АБИТУРИЕНТУ   СТУДЕНТУ   ВЫПУСКНИКУ   СОТРУДНИКУ   РАСПИСАНИЯ


БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

ГЛАВНАЯ
НАШ ФАКУЛЬТЕТ
ПОСТУПЛЕНИЕ
ПЕРЕВОД И ВОССТАНОВЛЕНИЕ
ОБРАЗОВАНИЕ
Учебно-методическая комиссия
Бакалавриат
Магистратура
Аннотации элективных дисциплин
Аспирантура
Докторантура
Выпускникам 2017
Конкурсы и стипендии
Соц. пакет студента
Вопросы по справкам и документам
НАУКА
ЭТИЧЕСКИЙ КОМИТЕТ
ШКОЛЬНИКАМ И УЧИТЕЛЯМ
СТУДСОВЕТ
БИБЛИОТЕКА
ЭКСПЕРТНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
САЧОК
БЛОГ
ТРУДОУСТРОЙСТВО
АДМИНИСТРАЦИЯ
СВЕДЕНИЯ О СПбГУ
ЗЕЛЕНЫЙ КАМПУС

Авторизация
Запомнить меня на этом компьютере
  Забыли свой пароль?
 

Главная / Образование / Магистратура

Магистерские дипломы




Музаев Дмитрий Михайлович

Квалификационная работа магистра: "Создание коллекции плазмид и ауксотрофных штаммов дрожжей Pichia pastoris для биотехнологии"

Аннотация: Дрожжи Pichia pastoris являются эффективной системой для синтеза множества рекомбинантных белков, однако с генетической точки зрения изучены не так детально как близкородственные им сахаромицеты. P. pastoris используются для производства самых разнообразных белков, начиная от столбнячного токсина и мышиного эпидермального фактора роста и заканчивая мембранными белками, включающими ABC транспортеры, аквапорины и тетраспанины. Активное использование дрожжей P. pastoris в современных биотехнологических производствах напрямую связано с особенностями их метаболизма. К преимуществам метилотрофных дрожжей можно отнести относительную простоту культивирования, дешевизну среды, хорошо адаптированные методики генетических манипуляций, возможность осуществления посттрансляционных модификаций белков (например, эукариотического процессинга и гликозилирования). Целью данной работы является создание коллекции плазмид и ауксотрофных штаммов P. pastoris. На первом этапе работы на основе вектора pTZ57R/T, были получены плазмиды, содержащие последовательности генов ADE2, URA3, LEU2, LYS5 и TRP1, ограниченные сайтами узнавания эндонуклеаз рестрикции. Далее на основе векторов pTZ57R/T-URA3, pTZ57R/T-LYS5, pTZ57R/T- LEU2, pTZ57R/T- TRP1 и pTZ57R/T-ADE2 были созданы конструкции для внесения делеций в соответствующие гены P. pastoris. Полученные плазмиды pTZ57R/T-∆ura3 и pTZ57R/T-∆lys5 были использованы для создания штаммов P.pastoris, характеризующихся ауксотрофностями по урацилу и лизину соответственно. Получение штаммов, характеризующихся другими ауксотрофностями осложняется отсутствием методов негативной селекции. Поэтому нами были созданы плазмиды, позволяющие проводить дисрупцию генов ADE2, LEU2 и TRP1 последовательностью гена URA3. Также были созданы плазмиды, позволяющие проводить последующую делецию данных генов. Помимо упомянутых выше штаммов для экспрессии чужеродных генов в P. pastoris необходимо наличие векторов, несущих ген соответствующих маркеров, позволяющих проводить селекцию трансформантов. Для этого фрагменты, содержащие последовательность гена HIS4, в составе вектора pPIC9 были замещены на последовательности генов ADE2, URA3, LYS5 и TRP1. Созданная в ходе работы коллекция плазмид и ауксотрофных штаммов позволяет осуществлять множественную интеграцию чужеродных генов в геном P. pastoris. Полученные результаты имеют огромное практическое значение, поскольку позволяют оптимизировать синтез рекомбинантных белков за счет строгого контроля количества копий чужеродного гена или за счёт коэкспрессии генов, кодирующих различные вспомогательные факторы.

Направление: Биология

Кафедра: Генетики и Селекции

Научный руководитель: д.б.н., доц. Самбук Е.В.

Дата защиты: 6-06-2014

Отзыв о магистранте:

Текст (.pdf)

Рецензент: Матвеенко А.Г.

Рецензия:

Текст (.pdf)

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2011г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2012г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2013г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2014г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2015г.

Аннотации квалификационных работ магистров выпуска 2016г.


контакты       карта сайта      почтовый сервер       управление      поддержка

199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9
© Санкт-Петербургский государственный университет, 2006-2017